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蓝莓Vaccinium spp.作为一种新兴果树，是近年许多国家发展十分迅速的优良果树之一，尤其是欧美国家。英国权威营养学家将蓝莓列为15种健康食品之首，联合国粮农组织也将蓝莓列为人类五大健康食品（苹果Malus spp.，杏Prunus spp.，香蕉Musa spp.，黑莓Rubus spp.，蓝莓）之一。1906年，美国Coville率先进行了蓝莓野生资源的选育工作。自1937年美国首次对筛选出的15个蓝莓品种进行商业性栽培至今，其栽培历史不足百年。目前，美国、加拿大、波兰、荷兰、挪威等国家在蓝莓的育种、栽培、加工及物流等方面已取得突出成就。中国吉林农业大学郝瑞教授于20世纪80年代初对中国长白山地区的野生笃斯蓝莓Vaccinium uliginosum资源进行系统调查工作为开端，至今不过30余年。1983年，吉林农业大学李亚东‘73率先在中国开展了蓝莓引种栽培工作。继吉林农业大学之后，中国科学院南京植物所于1988年也开始了蓝莓栽培研究，并筛选出适合中国南方地区栽培的优良品种，如兔眼蓝莓Vaccinium ashei及南高丛蓝莓Vaccinium corymbosum品种‘引。本文综述了蓝莓的生物学特性，以及近年来有关蓝莓生理生化特性和分子生物学特性方面的最新研究进展，以期能为蓝莓的相关科研工作以及栽培管理工作提供启示。

1  蓝莓生物学特性

1.1  蓝莓主要栽培种类

蓝莓为杜鹃花科Eficaceae越橘属yacc inium植物，全世界约有400余种，分布子北半球的温带和亚热带。中国约有91个种28个变种，主要分布于东北和西南地区。目前，主栽品种有高丛蓝莓Vac-cinium corymbosum，矮丛蓝莓Vaccinium chamaebuxus和兔眼蓝莓Vaccinium ashei等3个种类。高丛蓝莓主产于北美温带、亚热带，是目前全世界人工栽植面积最大的蓝莓种类，它又可分为北高丛蓝莓、南高丛蓝莓和半高丛蓝莓。北高丛蓝莓适宜栽植在低温休眠期稍长的北方；而南高丛蓝莓需要低温休眠的时间短，适合南方栽植；半高丛蓝莓是高丛蓝莓与矮丛蓝莓的杂交种，适宜栽植在休眠期较长、寒冷的北方。矮丛蓝莓主要分布于美国东北部和加拿大东部沿海地区，以野生资源为主，适宜栽植在北方寒冷地区。兔眼蓝莓原产北美洲亚热带地区，树势旺盛，抗逆性强，丰产，对土壤pH值的要求幅度较宽，休眠期与需水期均较短，适合中国南方地区栽培。蓝莓为喜光树种，且须栽植在排水性良好，并富含有机质的酸性土壤(pH 4.2-5.5)上。

1.2蓝莓形态特征

蓝莓为丛生灌木，树体高度因种类不同存在着较大差异。高丛蓝莓通常为2.0-3.0 m，矮丛蓝莓为0.7-1.5 m．而兔眼蓝莓通常为2.0-5.0 m，最高甚至可达10.0 in。常绿或落叶，单叶互生，叶全缘或有锯齿。花冠常呈坛形或铃形。花瓣基部联合，外缘4裂或5裂，白色或粉红色。雄蕊为8-10个，嵌入花冠基部围绕花柱生长，较花柱短，由昆虫或风媒授粉，花序多为总状花序。多数品种果实成熟时呈蓝黑色，有的品种为红色，果实有球形、椭圆形、扁圆形或梨形等不同形状，平均单果质量为0.5-2.59，果肉细软，多浆汁，内含较多且细的种子。根系多而纤细，无根毛，分布浅。

1.3蓝莓生长、开花和结实习性

蓝莓枝梢生长量大，在一个生长季内有2次生长高峰，第1次是在5月至6月，第2次是在7月中旬至8月中旬。兔眼蓝莓还可以有第3次生长高峰。幼苗定植后的第3年，新枝萌发力增强且生长旺盛，年生长量达LO m以上。当年生枝顶端多形成花芽，以向基的方式进行分化，每一枝条分化的花芽数量与品种及枝条粗度有关。高丛蓝莓一般每根枝条花芽数4—7个，兔眼蓝莓3-6个。蓝莓花芽分化时期因品种而异，矮丛蓝莓和高丛蓝莓一般在7月至8月开始花芽分化，兔眼蓝莓从6月中旬开始分化；10月份花芽形态分化基本完成。从形态上看，蓝莓花芽肥大，呈椭圆形或近球形。花芽以下为一些窄尖的营养芽和休眠芽。

蓝莓花期因气候和品种而异，中国南方3月上、中旬开花，而北方为4月至5月，花期一般为15~20 d，最长可达40 d。花着生在一个伸长的轴上，构成总状花序。开花的同时营养芽开始发育成营养枝，营养枝生长到一定程度便停止生长，顶端最后一个细尖的幼叶变黑形成黑尖，黑尖维持2周后脱落。2-4周后，位于黑尖下的营养芽长出新枝，并具有顶端优势，即实现枝条的转轴生长，这种转轴生长在南方1年有3-5次。夏季最后一次转轴生长时顶端紧挨黑尖的一个芽原始体逐渐增大发育成花芽，占据了顶端的位置。花芽在第2年春天开花并结果，结果后的短小枝秋后逐渐干枯、脱落，下部叶芽萌发新梢并形成花芽。

蓝莓多为异花授粉。高丛蓝莓自交可孕，但可孕程度因品种而异，且异花授粉可大大提高结实率；而兔眼蓝莓和矮丛蓝莓一般自交不孕。因此，在生产上须考虑多品种搭配建园，以提高产量。蓝莓的花受精后，子房迅速膨大，约持续1个月。之后，浆果停止生长并保持绿色，持续约1个月。然后浆果的花托端变为紫红色，而绿色部分呈透明状。当浆果进入变色期与着色期，增大迅速，果径可增长50%。之后，浆果还能再增长20%，且甜度和风味变得适中。同一果穗上的果实不同时成熟，以顶部、中部的果实先熟，成熟时间一般在6~8月。同一品种和同株树上的果实成熟期一般持续30 d左右。在贵州麻江和江苏南京，兔眼蓝莓早熟品种6月中旬开始成熟，晚熟品种7月上、中旬开始成熟。

2  蓝莓生理生化特性

2.1  蓝莓抗性生理

2.1.1  蓝莓抗旱性  干旱是制约农林业可持续发展的一个重要因素。干旱胁迫下，蓝莓叶绿素遭到破坏，光合速率下降，从而导致生长受到抑制。李亚东等对半高丛蓝莓‘北空“Northsky’的水分胁迫研究发现，在持续干旱条件下，‘北空’的生理功能遭到破坏，表现为叶片光合强度、叶绿素质量分数以及光量子通量密度降低；气孔导度和蒸腾强度升高；呼吸强度则表现为先升高后降低的趋势，直至连续干旱31 d时，植株才出现少量叶片焦枯的症状。因此，半高丛蓝莓‘北空’具有较强的耐干旱能力。Freeman等1研究了兔眼蓝莓叶表面蜡质层的季节变化，发现蓝莓抗旱机制与叶表面气孔周围的角质层形成有关。Erb等[17-18]采用盆栽试验法对多个蓝莓实生群体的抗旱性进行了评价，结果表明：南高丛蓝莓和兔眼蓝莓的抗旱性强于北高丛蓝莓。张德巧等通过对蓝莓叶片解剖结构的观测，分析了叶片解剖结构指标与抗旱性的关系，为蓝莓的抗旱性评估提供了科学依据，更为蓝莓抗旱性品种的选育提供了便捷有效的方法。这些结果表明，不同品种蓝莓具有不同的抗旱性，这可能与遗传及栽培环境等因素均有关系。

2.1.2蓝莓的抗寒性研究显示：不同品种蓝莓具有不同的抗寒性。Eck等研究发现，各种类蓝莓中，抗寒能力以矮丛蓝莓最强，半高丛蓝莓次之，高丛蓝莓最差。吴林等的研究结果与其完全一致。吴林等‘223还进一步利用蓝莓叶片栅栏组织与海绵组织的厚度比值和叶肉组织结构疏松度(SR)值对18个供试品种的抗寒性进行分级研究，发现其与田间观察结果基本一致，说明这2项指标与蓝莓抗寒性有着较密切的关系，并且初步推断蓝莓叶片栅栏组织与海绵组织的厚度比值越大、SR值越小的品种抗寒性越强。Arora等研究发现，‘蓝丰“Bluecrop’和‘维口“Weymouth’需冷量为1000 h，‘奥扎克蓝’‘Ozarkblue’为800 h，‘梯芙蓝“Tifblue’和‘莱格西“Legacy’为600 h，而抗寒性比较结果正是‘蓝丰’和‘维口’>‘奥扎克蓝’>‘梯芙蓝’和‘莱格西’，这说明蓝莓芽的抗寒性与需冷量大小之间存在正相关的关系。Rowland等‘241采用随机扩增多态性DNA (RAPD)基因连锁图谱分析测定了2个蓝莓野生杂交种（Vacciniu darrowii×y．elliottii和y．darrowii×V.caesariense）的需冷量与抗寒性差异，并通过分子标记连锁基因结合电导率测定得出了抗寒品种与不抗寒品种在65，60和14 kD多肽蛋白存在明显差异。

2.1.3  土壤pH值对蓝莓的影响  蓝莓通常适宜栽植在pH 4.2～5.2的土壤环境下，最适宜的pH 4.5-4.8；土壤pH值过高，通常会影响蓝莓对铁、镁等元素的吸收，从而引起失绿症；另一方面，土壤pH值过低(pH<3.2)又将导致叶片枯黄或枯萎；不同品种pH值适宜范围也有所不同，但无论品种如何，在酸性土壤上均生长良好。周琳等研究发现，在大兴安岭暗棕壤土上，矮丛蓝莓“美登”最适宜的pH 4.0-4.5，与李亚东等的研究结果相同；半高丛蓝莓‘北村“Northcountry’最适宜的pH 4.5—5.0。土壤pH值在植物花色苷的积累方面起着相当重要的作用。王斌等口51研究发现，当土壤为pH 4.0-5.0时，蓝莓果实中花色苷的量最多，特别当pH 4.5时蓝莓花色苷的积累更是达到了最大值，此时的土壤酸碱环境不仅有利于花色苷的积累，而且对蓝莓的生长也起到了明显的促进作用。其原因是在微酸性条件下，花色苷所包含的酮类化合物中的羰基容易结合氢离子形成带正电荷的羟基，从而有利于花色苷的合成。过低的土壤pH值容易破坏蓝莓根部，使其脱水伤害植物；过高的土壤pH值则会抑制蓝莓花色苷的积累。Spiere等在研究土壤中添加硫和石灰对兔眼蓝莓的影响试验中发现，当土壤pH>5.2时，不仅造成蓝莓缺乏铁、镁离子，从而导致失绿症状，并且还会导致树体中钠、钙离子积累过量而阻碍生长结果。李亚东等曾对半高丛蓝莓‘北空’，矮丛蓝莓‘美登“Blomidon’，高丛蓝莓‘艾朗“Aron’等3个品种在不同pH值下进行栽培试验，发现土壤pH值对这3个品种叶片中的铁、锰、钙等元素含量的影响明显。

2.2蓝莓光合生理特性

据李亚东等测定，蓝莓光合作用年变化呈双峰曲线。高丛和半高丛蓝莓第1次光合作用高峰出现在7月初，矮丛蓝莓则出现在7月中旬；第2次光合作用高峰均出现在8月下旬。高丛、半高丛和矮丛蓝莓春季展叶后光合强度较高，9月中旬以后随着叶片变色老化而迅速下降。高丛蓝莓和半高丛蓝莓光饱和点和光补偿点高，表现出喜光特性。而矮丛蓝莓光饱和点和光补偿点低，表明对弱光的利用能力强，对强光的利用能力弱。这一特点可为矮丛蓝莓的林果间作提供生理依据。李亚东等还对不同类型蓝莓叶片光合作用温度特性进行了比较研究，发现蓝莓春季光合作用的最适温度范围为15-28℃。光合速率在温度高于30℃或低于15℃时迅速下降，呼吸强度随温度上升而增强，超过30℃则减弱。刘兆玲等测定了兔眼蓝莓‘园蓝’‘Gardenblue’及高丛蓝莓‘夏普蓝“Sharpblue'奥尼尔“O'Neal’等3个品种的光响应曲线和叶绿素荧光参数。结果表明：供试品种间各个荧光参数值均无显著性差异，说明这3个品种的内在光系统的差异不大；‘园蓝’的最大净光合速率(A～)和表观量子效率(QE)最大，表明它的光合能力和抗逆性均最强；同时又具有较低的光饱和点(LSP)和较低的光补偿点(LCP)，表明它利用弱光的能力较强。  ‘奥尼尔’在同等条件下光合能力最弱，抵抗不良环境的能力也最差。因此，“园蓝”适宜栽培的范围最广，“奥尼尔”对环境的要求最严格。

2.3蓝莓花色苷功能及特性

蓝莓花色苷具有抗氧化、清除自由基、抗癌和改善视力等生物活性，具有巨大的保健功能。李颖畅等研究发现，蓝莓花色苷具有抗脂质体过氧化能力、还原能力以及清除羟基自由基、超氧阴离子自由基能力等。其抗脂质体过氧化能力强于抗坏血酸；还原能力和清除超氧阴离子自由基能力则不如抗坏血酸；低浓度时，花色苷清除羟基自由基的能力和抗坏血酸接近，高浓度时强于抗坏血酸。蓝莓花色苷抗脂质过氧化、清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(ic50)分别为165.97，141.12和345.71mg- L-l。据刘红锦等测定，花色苷与自由基清除率的相关系数分别为0.8481和0.7852，与油脂氧化抑制率的相关系数分别为0.8902和0.8307，具有较强相关性，说明蓝莓花色苷具有较强的抗氧化活性。李颖畅等用不同的溶剂对蓝莓果中的花色苷进行了提取，确定了体积分数60%乙醇为最好的提取溶剂，这与刘红锦等的研究一致。花色苷很不稳定，其结构对本身稳定性影响很大。一般来说，2一苯基苯并吡喃阳离子结构中羟基数目增加则稳定性降低，而甲基化程度提高则有利于提高其稳定性。孟宪军等对不同条件下蓝莓花色苷特征吸光值变化进行了研究，结果表明：蓝莓花色苷对酸碱度、温度、光照、氧化剂以及还原剂非常敏感，对食品添加剂的稳定性较好，高质量分数的葡萄糖、蔗糖、防腐剂对蓝莓花色苷有较明显的护色作用。金属离子中Na ，K ，Zn2 ，Mg2 ，Ca2 ，Cu2 ，Fe3 对该花色苷有不同程度的护色效果，而Ap 对其稳定性有明显的破坏作用。然而，李颖畅等m1的研究结果与其不尽相同。他们的研究发现，K 不能使花色苷的吸光度增加，对花色苷的稳定性也无显著影响；Ca2*，CH2 ，AI3 具有增色作用，但对花色苷的稳定性无显著影响；高质量分数Na ，Znz ．Mn2 具有增色作用，而且能够增强花色苷的稳定性；Fe2 ，Fe“，pb2 对花色苷具有破坏作用，使花色苷的稳定性下降。

3  蓝莓分子生物学特性

3.1  蓝莓营养物质代谢相关基因

3.1.1  蓝莓单脱氢抗坏血酸还原酶基因  抗坏血酸是植物细胞中一种重要的抗氧化剂。抗坏血酸一谷胱甘肽活性氧清除系统在抗氧化胁迫反应中起着关键的作用。单脱氢抗坏血酸还原酶是抗坏血酸代谢循环中的关键酶，它能够催化脱氢抗坏血酸还原为抗坏血酸。Harb等在蓝莓中分离得到的一个编码433个氨基酸的单脱氢抗坏血酸还原酶，其序列与豌豆Pisum sativum和葡萄Vitis Vinifera等植物中的单脱氢抗坏血酸还原酶基因序列同源性较高。结构同源性分析表明：该基因有保守的结构域：FAD或NAD(P)H的ADP结合区域和FAD的黄素结合区域。Northern杂交表明不同储藏条件下蓝莓果实的单脱氢抗坏血酸还原酶基因表达具有明显的差异，这与蓝莓抗坏血酸含量的变化相一致。与刚采收的蓝莓鲜果相比较，不同储藏条件下蓝莓果实的单脱氢抗坏血酸还原酶基因表达均有明显的下降，表明蓝莓果实不耐储藏。Wang等测定了不同品种蓝莓果实中抗氧化酶活性和非酶保护剂的量，结果表明：不同品种蓝莓果实具有不同的抗氧化酶活性和非酶保护剂的含量，其中兔眼蓝莓果实的单脱氢抗坏血酸还原酶活性最高，

其次是北高丛蓝莓。

3.1.2蓝莓黄酮类物质代谢相关基因  蓝莓果实中含有较高的黄酮类物质。Zifkin等对蓝莓生长发育过程中黄酮类物质的生物合成、基因定位和分子功能进行了研究。实时定量聚合酶链式反应(PCR)分析表明：黄酮类物质的生物合成遵循一个受到严格调控的双向性模式，而且基因表达谱与3个主要类型的黄酮类物质的含量相符。编码花青素还原酶与白花色素还原酶的基因主要在幼果和果实内的种子和中轴胎座表达。花青素聚合物平均包括7.0到8.5个亚基，其含量在蓝莓发育过程中比较稳定。黄酮类物质的变化和花青素相类似，其B环羟基化结构与黄酮一37．羟基化酶的表达量有关。相比之下，花青素主要在成熟后期积累，这与黄酮-3-0-糖基转移酶和黄酮一3757．羟基化酶表达水平达到最高相一致。编码花青素合成转录调节子R2R3-MYB的VeMYBPA1基因在整个发育阶段都有表达，对花青素的合成起到主要的调控作用。

3.2蓝莓抗寒基因

为了了解蓝莓在寒冷环境下基因表达的变化，Dhanaraj等利用‘蓝丰’品种在寒冷环境下和非寒冷环境下的花芽构建了2个eDNA文库，从2个cDNA文库中分别鉴别出了430个和483个独立的转录本。在全部的转录本中，只有4.3%是2个cDNA文库所共有的，这说明在寒冷与非寒冷环境下蓝莓基因表达明显不同。通过对已知功能的同源基因进行分类，主要分为细胞信号转导、细胞生长、衰老与死亡、细胞分化与植物成熟等。其中有2个基因衰老相关单加氧酶和脱水蛋白在寒冷条件下比在对照条件下表达高10倍，表明它们都与冷积累有关。Northern杂交表明，脱水蛋白在寒冷处理之前的花芽中表达较低，但是寒冷处理明显促进脱水蛋白高表达。另有光诱导蛋白、细胞周期蛋白和淀粉酶在寒冷条件下比在对照条件下表达高4倍，表明它们也是寒冷响应基因。Dhanaraj等还发现蓝莓在越冬的时候，体内65 kDa，60 kDa和14 kDa的脱水素会积累在花芽中，并且这些脱水素的含量与抗寒性有关。他们根据蓝莓花芽内编码14 kDa脱水素的RNA反转录得到了cDNA，并对其进行了测序。此cDNA全长为653 bp，包括55 bp 5’非翻译区(UTR)，303 bp开放阅读框(ORF)，213 bp 3'UTR和82 bp poly A。他们发现14 kDa脱水素在寒冷胁迫下大量产生，且耐寒品种的14 kDa脱水素基因表达量更高。赵鑫等将胚胎成熟基因(LEA)转入半高丛蓝莓‘北陆“Northland’中，并对其抗寒性进行了研究。他们通过逆转录，聚合酶链式反应(RT-PCR)发现，转入的LEA基因大部分都能正常表达。他们还发现，LEA基因的过量表达能够提高蓝莓在低温条件下体内的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性，并且降低体内的丙二醛(MDA)质量分数。

4  展望

中国对蓝莓的研究正飞速发展，但起步较晚，起始于20世纪80年代初。因此，对于蓝莓各方面的研究还不够深入。蓝莓的土壤pH值适应范围为何如此狭窄的生理生化方面问题以及蓝莓同一枝条上的果实不同时期成熟的分子生物学方面问题都值得我们进一步地研究。蓝莓作为一种营养丰富，具有巨大保健功能和极高经济价值的果树，必将在人民生活水平不断提高的今天受到越来越多的关注。随着科学的不断发展和技术的不断革新，蓝莓的研究必将逐步深入，其潜在的功效将被不断得到开发和利用，为人类的健康增添风采。

方仲相1，胡君艳1，江  波1，方  佳1，何勇清1，卢伟民2，郑炳松1（1．浙江农林大学亚热带森林培育省部共建国家重点实验室培育基地，浙江临安311300;2．浙江农林大学后勤集团，浙江临安311300）

浙江农林大学学报．2013，30(4): 599 - 606

马桂莲、张琴采集；俞美莲、姚佳编译；姚利根、姚佳编辑上传；江洪涛审核。

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